Способы и методики определения гликозилированного гемоглобина в крови
В последнее время по всему миру можно наблюдать рост числа заболевших сахарным диабетом, диагностировать который можно только лабораторными методами. Важнейшим показателем при определении данного заболевания является уровень гликозилированного гемоглобина, который совсем недавно Всемирной Организацией Здравоохранения был принят как показатель, по которому ставится диагноз без проведения дополнительных исследований. Причём регулярно проверять свой уровень гликозилированного гемоглобина должны как здоровые люди, так и те пациенты, у которых сахарный диабет уже был подтверждён.
Принципы определения гликозилированного гемоглобина
За более чем тридцатилетнюю историю проведения лабораторных исследований гликозилированного гемоглобина было разработано огромное количество различных методов определения этого показателя. До сих пор нет единого международного стандарта, при котором можно было бы нормировать полученные показатели при различных способах проведения исследований. Между тем многие специалисты уверены, что следует отдавать предпочтение анализаторам на основе метода DCCT.
Считается нормой, если показатель гликозилированного гемоглобина находится в пределах до 6 процентов. Диагноз «сахарный диабет» ставится при показателе свыше 6,5 процентов.
В настоящее время в медицине наиболее часто для определения гликозилированного гемоглобина используют жидкостную и аффинную хроматографии, электрофорез. Кроме этого некоторые лаборатории применяют колоночные методики, нефелометрический и турбидиметрический анализ, а также различные иммунологические методики. Все вышеперечисленные способы определения гликозилированного гемоглобина стандартизированы, процедура анализа относительно проста и занимает непродолжительное время.
Основные методы определения
Для определения гликозилированного гемоглобина достаточно часто используют высокоэффективную жидкостную хроматографию. В данном методе необходимые расчеты проводятся в автоматическом режиме с помощью специального анализатора. Необходимая калибровка производится по двум стандартам, а расчеты выдаются в процентном выражении. Основным недостатком данного способа определение содержания гликозилированного гемоглобина в крови является дороговизна используемого оборудования.
Широкое распространение во многих лабораториях получила ионообменная хроматография низкого давления, используемая для определения уровня гликозилированного гемоглобина. Данный метод подразумевает для проведения исследований использование мобильных анализаторов, при помощи которых узнаётся процентное содержание гликозилированного гемоглобина в присутствии некоторых групп гемоглобинов. Данный процесс пробоподготовки прошёл необходимую стандартизацию, сама процедура измерения занимает в среднем до пяти минут.
При беременности нормой считается показатель гликозилированного гемоглобина в пределах до 6,5 процентов от общего количества гемоглобина в крови.
Ещё одним сертифицированным способом определения гликозилированного гемоглобина является ионообменная хроматография. При данном методе кровь особым образом смешивается с лизирующим раствором, который в больших концентрациях содержит детергент и борат-ионы, после чего добавляется катион-обменная смола. Разделение супернатанта от смолы происходит в специальном сепараторе. Далее происходит измерение плотности всей фракции и определение показателей. Для проведения исследования лаборатория должна быть оснащена полуавтоматическим биохимическим анализатором, фотометром и соответствующими наборами реагентов.
Всё большую популярность в наше время приобретают компактные портативные анализаторы, предназначенные для определения гликозилированного гемоглобина в крови. Данные системы обладают высокой скоростью получения результатов, просты в использовании и за счёт своих небольших размеров могут быть использованы в любых условиях. Их практически единственным недостатком является высокая стоимость проводимого теста.
В последние годы достаточно часто для определения гликозилированного гемоглобина используется иммунотурбидиметрия. Данный метод позволяет напрямую определить содержание гемоглобина в процентном выражении в цельной крови. Все измерения производятся при помощи автоматических и полуавтоматических биохимических анализаторов. Его основным преимуществом является сравнительно небольшая стоимость проведения анализа и быстрота исследования.
На сегодняшний день используется множество различных методов, позволяющих определять гликозилированный гемоглобин. Между тем до сих пор до конца не изучены все основные преимущества того или иного исследования. Связанно это прежде всего с тем, что в мире нет согласованности в стандартах, при которых можно было бы откорректировать все используемые методы. Для России основным критерием при выборе анализатора является наличие у прибора сертификата категории NGSP.
